逆轉(zhuǎn)錄去基因組DNA一管化預混液
貨號 | 名稱 | 規(guī)格 | 價格(元) |
MD80101 | All-in-One First-Strand SuperMix (with dsDNase) | 100次 | 785 |
產(chǎn)品簡介 | 實驗流程 |
All-in-One First-Strand SuperMix (with dsDNase) 是一款高效、便捷、減少污染的高質(zhì)量一鏈cDNA合成試劑盒,包含M-MLV GIII Reverse Transcriptase及其反應Buffer、RNA酶抑制劑、dNTPs、Oligo(dT)??VN和隨機引物等一鏈cDNA合成所需的所有組分,僅需加入RNA模板和水即可開始反應。使用該逆轉(zhuǎn)錄試劑盒獲得的cDNA,下游可用于qPCR、普通PCR等實驗。 RNA中存在基因組DNA污染,如果反轉(zhuǎn)錄前不做去除處理,下游進行qPCR反應時基因組DNA與cDNA會同時進行擴增,尤其是引物設(shè)計在同一外顯子上時。本試劑盒采用dsDNase高效去除基因組DNA污染,區(qū)別于常規(guī)的DNase I,dsDNase能夠特異性的消化雙鏈DNA(dsDNA以及DNA與RNA的雜合鏈),并且具有熱敏感性,可在高溫條件下快速不可逆地失活。與傳統(tǒng)使用DNase I去除基因組DNA污染的方法相比,dsDNase無需額外加入EDTA進行失活,不僅節(jié)省實驗時間,而且降低了對逆轉(zhuǎn)錄反應的抑制。本產(chǎn)品作為升級后的一鏈cDNA合成試劑盒,15分鐘內(nèi)最長可獲得12 kb cDNA。 可依據(jù)基因組污染嚴重程度選擇采用去基因組DNA污染與反轉(zhuǎn)錄分開進行的操作方法,或者去基因組污染與反轉(zhuǎn)錄一步法進行的操作方法。 |
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提取流程 | |
產(chǎn)品特性與優(yōu)點 | |
產(chǎn)品參數(shù) | |
下載資源 |
說明書 |
預混液中的Oligo(dT)20VN和隨機引物,不僅適用于包含Poly(A)結(jié)構(gòu)的真核生物 mRNA,也適用于不含Poly(A) 結(jié)構(gòu)的原核生物 RNA、真核生物rRNA和tRNA等模板,但不適用于miRNA等小RNA模板。由于隨機引物會在RNA任意位置開始逆轉(zhuǎn)錄,因此不建議使用本產(chǎn)品進行真核生物全長cDNA克隆。