無内毒素質粒提取系列--廣州市拓譜生物工程有限公司

無内毒素質粒大(dà)提試劑盒

100~250ml菌液,高達100~1500µg低内毒素的(de)質粒DNA

貨号 名稱 規格 價格(元)
P1156-02 HiPure Plasmid EF Maxi Kit 10次 750
P1156-03 HiPure Plasmid EF Maxi Kit 50次 3500
P1156-02B HiPure Plasmid EF Maxi Kit(增強版) 10次 735
P1156-03B HiPure Plasmid EF Maxi Kit(增強版) 50次 3500
   
産品簡介 實驗流程


本産品适合于(yú)從100~250ml細菌培養液中提取100~1500µg低内毒素的(de)質粒DNA。産品采用獨特的(de)溶液體系,可處理各種質粒載體,包括常規高低中拷貝數的(de)載體、大(dà)型載體,如BAC,Cosmid,P1等。DNA産量取決于(yú)載體拷貝數和(hé / huò)菌液量。純化的(de)質粒内毒素含量低于(yú)0.1EU/µg,可直接用于(yú)細胞轉染,動物注射等。

P1156&P1156B與競品相似,都是(shì)醇類介導的(de)純化方式。菌體經堿裂解酸中和(hé / huò)後制備出(chū)上(shàng)清液,可選的(de)Triton X114雙水相萃取步驟可進一(yī / yì /yí)步去除内毒素,然後加入異丙醇或乙醇調節結合條件過柱進行純化,得到(dào)的(de)質粒可以(yǐ)滿足大(dà)部分的(de)細胞轉染。本産品操作簡單和(hé / huò)純度高,但醇類介導特殊性不(bù)強,得到(dào)質粒DNA常受到(dào)RNA污染,造成OD濃度與電泳亮度不(bù)相符合,OD濃度虛高,特别是(shì)中低拷貝載體優爲(wéi / wèi)明顯,得到(dào)的(de)質粒再用異丙醇沉澱可去除RNA污染,讓OD濃度更爲(wéi / wèi)真實。

P1156B是(shì)在(zài)P1156基礎上(shàng)優化的(de),是(shì)增強版,對Triton X114雙水相萃取内毒素步驟進化優化,無需水浴和(hé / huò)溫育就(jiù)可以(yǐ)萃取内毒素分子(zǐ),縮了(le/liǎo)操作時(shí)間。P1156B還增加中和(hé / huò)内毒素分子(zǐ)的(de)清洗液,得到(dào)的(de)質粒DNA内毒素水平更低,RNA污染水平也(yě)有明顯改進。

P1158不(bù)采用醇類介導過柱,而(ér)是(shì)高鹽介導過柱。高鹽介導特異性強,得到(dào)的(de)質粒DNA不(bù)存在(zài)RNA污染,OD濃度和(hé / huò)電泳亮度相符,質粒OD濃度真實不(bù)虛高,轉染時(shí)質粒定量準确,更有利于(yú)結果分析。處理質粒載體多樣、轉染定量準确、以(yǐ)及内毒素水平低的(de)項目推薦使用該産品。受産品中胍鹽污染,當質粒總量低于(yú)200ug時(shí),A260/230較低(1.0~1.5),但不(bù)影響下遊轉染等應用。

 
 
提取流程

試劑盒采用玻纖濾膜純化術,隻需進行簡單的(de)結合-洗-洗脫的(de)步驟。細菌經離心收集後,首先用堿裂法進行裂解中和(hé / huò),并通過離心去除蛋白質和(hé / huò)基因組;上(shàng)清液再經過帶濾膜的(de)注射器去除雜質和(hé / huò)内毒素,然後将澄清的(de)裂解物加到(dào)純化柱中進行離心或抽濾,質粒DNA吸附在(zài)玻纖膜上(shàng)雜質經過兩次清洗去除最後用少量洗脫液或水洗脫出(chū)純化的(de)DNA

 
産品特性與優點
  • 高純度 - 純化的(de)質粒可直接于(yú)測序,酶切,PCR等運用
  • 快速 - 快速矽膠柱純化方式,遠遠快于(yú)離子(zǐ)交換
  • 高産量 - 一(yī / yì /yí)個(gè)柱子(zǐ)可結合高達1.5mg質粒
  • 超低内毒素 -質粒内毒素含量低于(yú)0.1EU/µg,可直接用于(yú)細胞轉染,動物注射等
 
産品參數
主要(yào / yāo)功能 從100~250ml細菌培養液中提取100~1500µg低内毒素的(de)質粒DNA
純化産物 質粒DNA
下遊應用 細胞轉染,動物注射等
純化方式 大(dà)柱高速離心型
純化技術 玻纖濾膜純化柱
操作方法 離心操作
樣品類型 常規高低中拷貝數的(de)載體、大(dà)型載體
樣品用量 高拷貝數載體:100-150ml培養液;低拷貝數載體:150-250ml培養液
核酸産量 100~1500µg
最少洗脫體積 0.7ml
操作時(shí)間 不(bù)超過60分鍾
柱子(zǐ)每次載液體積 20ml
柱子(zǐ)最大(dà)核酸載量 1mg
 
下載資源
說(shuō)明書
性能驗證報告
異丙醇沉澱質粒去除RNA污染的(de)方法
 
更多詳細信息
産品樣式
  • 公司名稱:廣州市拓譜生物工程有限公司
  • 電話:020-89857862
    訂貨電話1:020-89857862(李小姐)
    廣東省外訂貨電話2:13660745235(孔小姐)
    廣州市訂貨電話3:18027426573(朱先生)
    渠道(dào)(OEM/代理):13149396062(葉小姐)
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