100~250ml菌液,高達100~1500µg低内毒素的(de)質粒DNA
貨号 | 名稱 | 規格 | 價格(元) |
P1156-02 | HiPure Plasmid EF Maxi Kit | 10次 | 750 |
P1156-03 | HiPure Plasmid EF Maxi Kit | 50次 | 3500 |
P1156-02B | HiPure Plasmid EF Maxi Kit(增強版) | 10次 | 735 |
P1156-03B | HiPure Plasmid EF Maxi Kit(增強版) | 50次 | 3500 |
産品簡介 | 實驗流程 |
本産品适合于(yú)從100~250ml細菌培養液中提取100~1500µg低内毒素的(de)質粒DNA。産品采用獨特的(de)溶液體系,可處理各種質粒載體,包括常規高低中拷貝數的(de)載體、大(dà)型載體,如BAC,Cosmid,P1等。DNA産量取決于(yú)載體拷貝數和(hé / huò)菌液量。純化的(de)質粒内毒素含量低于(yú)0.1EU/µg,可直接用于(yú)細胞轉染,動物注射等。
P1156&P1156B與競品相似,都是(shì)醇類介導的(de)純化方式。菌體經堿裂解酸中和(hé / huò)後制備出(chū)上(shàng)清液,可選的(de)Triton X114雙水相萃取步驟可進一(yī / yì /yí)步去除内毒素,然後加入異丙醇或乙醇調節結合條件過柱進行純化,得到(dào)的(de)質粒可以(yǐ)滿足大(dà)部分的(de)細胞轉染。本産品操作簡單和(hé / huò)純度高,但醇類介導特殊性不(bù)強,得到(dào)質粒DNA常受到(dào)RNA污染,造成OD濃度與電泳亮度不(bù)相符合,OD濃度虛高,特别是(shì)中低拷貝載體優爲(wéi / wèi)明顯,得到(dào)的(de)質粒再用異丙醇沉澱可去除RNA污染,讓OD濃度更爲(wéi / wèi)真實。 |
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提取流程 | |
本試劑盒采用玻纖濾膜純化技術,隻需進行簡單的(de)結合-洗滌-洗脫的(de)步驟。細菌經離心收集後,首先用堿裂法進行裂解中和(hé / huò),并通過離心去除蛋白質和(hé / huò)基因組;上(shàng)清液再經過帶濾膜的(de)注射器去除雜質和(hé / huò)内毒素,然後将澄清的(de)裂解物加到(dào)純化柱中進行離心或抽濾,質粒DNA吸附在(zài)玻纖膜上(shàng);雜質經過兩次清洗被去除,最後用少量洗脫液或水洗脫出(chū)純化的(de)DNA。 |
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産品特性與優點 | |
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産品參數 | |
主要(yào / yāo)功能 | 從100~250ml細菌培養液中提取100~1500µg低内毒素的(de)質粒DNA |
純化産物 | 質粒DNA |
下遊應用 | 細胞轉染,動物注射等 |
純化方式 | 大(dà)柱高速離心型 |
純化技術 | 玻纖濾膜純化柱 |
操作方法 | 離心操作 |
樣品類型 | 常規高低中拷貝數的(de)載體、大(dà)型載體 |
樣品用量 | 高拷貝數載體:100-150ml培養液;低拷貝數載體:150-250ml培養液 |
核酸産量 | 100~1500µg |
最少洗脫體積 | 0.7ml |
操作時(shí)間 | 不(bù)超過60分鍾 |
柱子(zǐ)每次載液體積 | 20ml |
柱子(zǐ)最大(dà)核酸載量 | 1mg |
下載資源 |
說(shuō)明書 |
性能驗證報告 |
異丙醇沉澱質粒去除RNA污染的(de)方法 |