逆轉錄去基因組DNA一(yī / yì /yí)管化預混液
貨号 | 名稱 | 規格 | 價格(元) |
MD80101 | All-in-One First-Strand SuperMix (with dsDNase) | 100次 | 785 |
産品簡介 | 實驗流程 |
All-in-One First-Strand SuperMix (with dsDNase) 是(shì)一(yī / yì /yí)款高效、便捷、減少污染的(de)高質量一(yī / yì /yí)鏈cDNA合成試劑盒,包含M-MLV GIII Reverse Transcriptase及其反應Buffer、RNA酶抑制劑、dNTPs、Oligo(dT)₂₀VN和(hé / huò)随機引物等一(yī / yì /yí)鏈cDNA合成所需的(de)所有組分,僅需加入RNA模闆和(hé / huò)水即可開始反應。使用該逆轉錄試劑盒獲得的(de)cDNA,下遊可用于(yú)qPCR、普通PCR等實驗。 RNA中存在(zài)基因組DNA污染,如果反轉錄前不(bù)做去除處理,下遊進行qPCR反應時(shí)基因組DNA與cDNA會同時(shí)進行擴增,尤其是(shì)引物設計在(zài)同一(yī / yì /yí)外顯子(zǐ)上(shàng)時(shí)。本試劑盒采用dsDNase高效去除基因組DNA污染,區别于(yú)常規的(de)DNase I,dsDNase能夠特異性的(de)消化雙鏈DNA(dsDNA以(yǐ)及DNA與RNA的(de)雜合鏈),并且具有熱敏感性,可在(zài)高溫條件下快速不(bù)可逆地(dì / de)失活。與傳統使用DNase I去除基因組DNA污染的(de)方法相比,dsDNase無需額外加入EDTA進行失活,不(bù)僅節省實驗時(shí)間,而(ér)且降低了(le/liǎo)對逆轉錄反應的(de)抑制。本産品作爲(wéi / wèi)升級後的(de)一(yī / yì /yí)鏈cDNA合成試劑盒,15分鍾内最長可獲得12 kb cDNA。 可依據基因組污染嚴重程度選擇采用去基因組DNA污染與反轉錄分開進行的(de)操作方法,或者去基因組污染與反轉錄一(yī / yì /yí)步法進行的(de)操作方法。 |
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提取流程 | |
産品特性與優點 | |
産品參數 | |
下載資源 |
說(shuō)明書 |
預混液中的(de)Oligo(dT)20VN和(hé / huò)随機引物,不(bù)僅适用于(yú)包含Poly(A)結構的(de)真核生物 mRNA,也(yě)适用于(yú)不(bù)含Poly(A) 結構的(de)原核生物 RNA、真核生物rRNA和(hé / huò)tRNA等模闆,但不(bù)适用于(yú)miRNA等小RNA模闆。由于(yú)随機引物會在(zài)RNA任意位置開始逆轉錄,因此不(bù)建議使用本産品進行真核生物全長cDNA克隆。